Produção de coagulante por uma espécie de cogumelo comestível em resíduo lignocelulósico
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Orientador(es)
Coorientador(es)
Martim, Salomão Rocha
Membros da banca
Rocha, Waldireny Caldas
Silva, Larissa Svetlana Cavalcante
Silva, Larissa Svetlana Cavalcante
Pós-Graduação
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Universidade Federal do Amazonas
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Resumo
Nas últimas décadas, diversas pesquisas estão revelando cogumelos comestíveis como fontes
naturais de proteases coagulantes do leite, com características promissoras para o
desenvolvimento de produtos lácteos. Devido ao aumento sucessivo na produção mundial de
queijo, existe a necessidade da continuidade de estudos para descoberta de substitutos
alternativos do coalho animal. Nesse contexto, este estudo foi realizado com o objetivo de
avaliar o crescimento de Lentinus crinitus DPUA 1693 para eleger fontes nutricionais para
produção de proteases e coagulantes. A espécie, cedida pela Coleção de Culturas DPUA, da
Universidade Federal do Amazonas, foi cultivada em BDA+ Extrato de Levedura 0,5% (p/v).
Para selecionar o meio de cultura visando à obtenção do inóculo de L. crinitus foram usados
ágar batata dextrose (BDA+YE), ágar batata dextrose in natura (BDAIN+YE), ágar aveia
(AA+YE), ágar inhame-roxo (Dioscorea alata) (PYA+YE), suplementados com extrato de
levedura (YE) 0,5 % ( p/v). Após seleção do inóculo, o crescimento do micélio de L. crinitus
foi avaliado por fermentação em estado sólido utilizando exocarpo de cupuaçu (CC) ,
exocarpo de tucumã (CT), semente de açaí (SA), exocarpo de abacaxi (CAB) e serragem
(SER), suplementados com farelo de arroz (FA). Estes meios foram esterilizados a 121 °C por
dois dias consecutivos. Para cultivo nos substratos lignocelulósicos, três discos miceliais,
medindo 8 mm de diâmetro, foram inoculados na superfície de cada mistura de resíduos. A
fermentação no estado sólido foi conduzida a 25 °C, na ausência de luz. Após 15 dias, as
proteases coagulantes foram extraídas em água destilada esterilizada, a 30 °C, 180 rpm. As
atividades proteolítica e coagulante foram determinadas usando como substrato a solução de
azocaseína 1% (p/v) e leite desnatado 10% (p/v), respectivamente, seguindo o cálculo da
razão coagulante. O bioprocesso com razão coagulante significativa foi caracterizado
parcialmente. Os resultados demonstraram que BDA+YE favoreceu o crescimento micelial
radial e foi selecionado como meio de cultura para a obtenção do inóculo de L. crinitus. Entre
os substratos, exocarpo de cupuaçu com farelo de arroz favoreceu desenvolvimento de
micélio fortemente adensado, atividade significativa de coagulantes (30,89 U) e, coágulo
forte. Com atividade coagulante ótima em pH 5, temperatura 50 oC, estabilidade em pH 5-7,
estabilidade em temperatura de 50- 60 oC, presença de aspártico e serino proteases, com isso
favorece a possível aplicação destas enzimas na indústria de laticínios.
Abstract
In recent decades, several researches are revealing edible mushrooms as natural sources of
milk coagulant proteases, with promising characteristics for the development of dairy
products. Due to the successive increase in world cheese production, there is a need for
further studies to discover alternative substitutes for animal rennet. In this context, this study
was carried out with the objective of evaluating the growth of Lentinus crinitus 1693 to
choose nutritional sources for the production of proteases and coagulants. The species,
provided by the DPUA Culture Collection, of the Federal University of Amazonas, was
cultivated in PDA + Yeast Extract 0.5% (w/v). To select the culture medium to obtain the
inoculum of L. crinitus, potato dextrose agar (PDA+YE), in natura potato dextrose agar
(PDAIN+YE), oat agar (AA+YE), purple yam agar (Dioscorea alata) (PYA+YE),
supplemented with yeast extract (YE) 0.5 % (w/v). After selection of the inoculum, the
growth of L. crinitus mycelium was evaluated by solid state fermentation using cupuaçu
exocarp (CC), tucumã exocarp (CT), açaí seed (SA), pineapple exocarp (CAB) and sawdust
(SER), supplemented with rice bran (FA). These media were sterilized at 121 °C for two
consecutive days. For cultivation on lignocellulosic substrates, three mycelial discs,
measuring 8 mm in diameter, were inoculated on the surface of each waste mixture. Solid
state fermentation was conducted at 25°C, in absence of light. After 15 days, coagulant
proteases were extracted in sterile distilled water at 30°C, 180 rpm. The proteolytic and
coagulant activities were determined using as substrate 1% azocasein solution (w/v) and 10%
(w/v) skim milk, respectively, following the calculation of the coagulant ratio. The bioprocess
with significant coagulant ratio was partially characterized. The results showed that PDA+YE
favored the radial mycelial growth and was selected as a culture medium to obtain the
inoculum of L. crinitus. Among the substrates, cupuaçu exocarp with rice bran favored the
development of strongly dense mycelium, significant activity of coagulants (30.89 U) and
strong clot. With optimal coagulant activity at pH 5, temperature 50 oC, stability at pH 5-7,
stability at temperature 50-60 oC, presence of aspartic and serine proteases, thus favoring the
possible application of these enzymes in the dairy industry.
Descrição
Palavras-chave
Termo controlado
Cogumelos comestíveis - Cultivo; Coagulantes; Leite - Proteínas
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável (ODS)
Citação
BATISTA, Samara Claudia Picanço. Produção de coagulante por uma espécie de cogumelo comestível em resíduo lignocelulósico. 2021. 63 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus (AM), 2021.
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