Expressão do gene da lipase de Ralstonia eutropha em Pichia pastoris

Isabela Cavalcante Rodrigues

Expressão do gene da lipase de Ralstonia eutropha em Pichia pastoris

dc.contributor.advisor1	Spartaco Astolfi Filho
dc.creator	Isabela Cavalcante Rodrigues
dc.date.available	2016-09-23T15:39:08Z
dc.date.issued	2014-07-31
dc.description.resumo	As lipases são enzimas pertencentes à classe das hidrolases, atuando na interface orgânica-aquosa demonstrando níveis consideráveis de atividade e estabilidade em ambientes aquosos e não-aquosos. Sua função biológica é catalisar a hidrólise de longas cadeias de triacilglicerídeos, formando ácidos graxos e glicerol, além de realizarem esterificação. Possuem vasta aplicabilidade industrial, podendo ser utilizadas na composição de detergentes, na indústria alimentícia, no tratamento de efluentes e em química fina. O objetivo do projeto é clonar e expressar o gene de uma lipase bacteriana na levedura Pichia pastoris. O gene da lipase será isolado por reação em cadeia da polimerase. Os amplicons serão inseridos no vetor de clonagem pCR4 TOPO, multiplicados em Escheria coli, liberados do vetor de clonagem por clivagem com endonucleases de restrição e subclonado no vetor de expressão pPIC9. A levedura será transformada com o vetor recombinante e a expressão da proteína será visualizada em meio sólido contendo o subtrato da lipase. Os clones recombinantes serão inoculados em meio líquido com adição de metanol 0,5% a cada 24h para indução da expressão. A proteína expressa será analisada em gel desnaturante de poliacrilamida e a atividade enzimática será determinada a partir de métodos titulométricos.	pt_BR
dc.description.sponsorship	CNPQ	pt_BR
dc.format	PDF
dc.identifier.uri	https://coarihomolog.ufam.edu.br/handle/prefix/3728
dc.language	pt_BR	pt_BR
dc.pibic.curso	Biotecnologia	pt_BR
dc.pibic.dtfim	2014-07-31
dc.pibic.dtinicio	2013-08-01
dc.pibic.nrprojeto	PIB-B/0107/2013
dc.pibic.projeto	Expressão do gene da lipase de Ralstonia eutropha em Pichia pastoris
dc.publisher	Universidade Federal do Amazonas	pt_BR
dc.publisher.country	Brasil	pt_BR
dc.publisher.department	Biologia	pt_BR
dc.publisher.department	Instituto de Ciências Biológicas	pt_BR
dc.publisher.initials	UFAM	pt_BR
dc.publisher.program	PROGRAMA PIBIC 2013	pt_BR
dc.rights	Acesso Restrito	pt_BR
dc.subject	Enzimas, indução da expressão, clonagem
dc.subject.cnpq	CIÊNCIAS BIOLÓGICAS: BIOQUÍMICA	pt_BR
dc.title	Expressão do gene da lipase de Ralstonia eutropha em Pichia pastoris	pt_BR
dc.type	Relatório de Pesquisa	pt_BR

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