Utilização de peptídeos quiméricos das proteínas de envelope (E) , não estrutural 1 (NS1) e não estrutural 3 (NS3) para produção de insumos diagnósticos da dengue
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Autores
Orientador(es)
Coorientador(es)
Honda, Eduardo Rezende
Membros da banca
Astolfi Filho, Spartaco
Zanchi, Fernando Berton
Aprígio, Cesarino Junior Lima
Calvo, Fabrício
Zanchi, Fernando Berton
Aprígio, Cesarino Junior Lima
Calvo, Fabrício
Pós-Graduação
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Editor
Universidade Federal do Amazonas
Tipo
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DOI
Resumo
A infecção pelo vírus dengue continua sendo um grande problema de saúde pública em
regiões tropicais e subtropicais do mundo, sendo a principal doença viral transmitida por
artrópodes, com alta morbidade e mortalidade. O diagnóstico clínico da dengue requer
confirmação laboratorial devido à semelhança dos sintomas com uma série de outras febres
agudas e para detecção de infecções virais primárias ou secundárias. O desenvolvimento de
testes baratos, sensíveis, específicos e de fácil execução, que sejam capazes de proporcionar
diagnóstico precoce da infecção pelo vírus da dengue, é ainda uma necessidade. Neste
trabalho mapeamos, por ferramentas de bioinformática, peptídeos das proteínas de Envelope
(E), Não Estrutural 1 e 2 que apresentasse como características: elevada antigenicidade,
hidrofilicidade e probabilidade de se apresentar na superfície. O primeiro peptídeo, com peso
molecular de 17KDa, foi denominado E/ENS3 e corresponde a duas sequências da proteína de
Envelope (E) e uma sequência da Não Estrutural 3. O segundo peptídeo, com peso molecular
de 15Kda, foi denominado ENS1/3 e corresponde a uma sequência da proteína de Envelope
(E), uma sequência da Não Estrutural 1 e uma sequência da Não Estrutural 3. Os peptídeos
foram expressos em sistemas em sistema procarioto, purificados e utilizados em teste de
ELISA (Enzyme-Linked Assay Imunoabsorvente). Foram realizadas a detecção de anticorpos
IgM e IgG de amostras de laboratório, previamente caracterizadas, através de ELISA Indireto
e obteve-se os seguintes resultados: (1) na pesquisa de IgG usando os peptídeos E/ENS3 e
ENS1/3, a sensibilidade foi de 65% e a especificidade foi de 91,7% e (2) na pesquisa de IgM
a sensibilidade foi de 75,7% e especificidade foi de 91,8%. Estes resultados indicam que a
utilização dos peptídeos E/ENS3 e ENS1/3 podem ser uma alternativa para o diagnóstico
sorológico da dengue
Abstract
Dengue infection has become a public health problem in tropical and sub-tropical areas. It is a
viral disease transmitted by arthropods with high mortality rates. Its clinical diagnosis
requires laboratory confirmation because several other conditions can also cause similar
symptoms with acute fevers as well as the primary use antibodies or antigens for detection of
DENV. The continued development of diagnostic tests that are cheap, sensitive, specific, easy
to perform, and that are capable of giving early diagnosis of the dengue virus infection is still
a needed. Using bioinformatics, we mapped peptides of Envelope protein (E), Nonstructural 1
and 2 which have antiginity, hidrofility and probality to apper on the surface. The first
peptide, with molecular weight of the 17KDa, was called E/ENS3 and corresponds to two
Envelope protein (E) sequences and a Nonstructural 3 sequence. The second peptide, with
molecular weight of the 15Kda, was called ENS1/3 and it corresponds to a Envelope protein
(E) sequence, a Nonstructural 1 sequence and Nonstructural 3 sequence. The peptides were
expressed in prokaryotic sistem, purified and used in ELISA (Enzyme-Linked Assay
Imunoabsorvente). Using Indirect ELISA in the IgM and IgG antibody detection previously
characterized, we obtained as results: (1) IgG research using E/ENS3 and ENS1/3 peptides,
sensibility was 65% and the specificity was 91,7% and (2) IgM research, sensibility was
75,7% and and the specificity was 91,8%. These results indicate that use of both E/ENS3 and
ENS1/3 peptides may be a alternative to the serological diagnosis of dengue.
Descrição
Palavras-chave
Termo controlado
Dengue; Peptídeos; Biomoléculas; Doença viral
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável (ODS)
Citação
RIOS, Katiúscia Alexandre. Utilização de peptídeos quiméricos das proteínas de envelope (E) , não estrutural 1 (NS1) e não estrutural 3 (NS3) para produção de insumos diagnósticos da dengue. 2014. 108 f. Tese ( Doutorado em Biotecnologia) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2014.
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