Transformação genética para a integração de dois cassetes de expressão no genoma da levedura Pichia pastoris.

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dc.contributor.advisor1Spartaco Astolfi Filho
dc.creatorJoão Victor de Melo Verçosa
dc.date.available2016-09-23T15:39:08Z
dc.date.issued2014-07-31
dc.description.resumoA Pichia pastoris foi considerada uma das melhores leveduras para expressão devido a sua característica metilotrófica, pois permitem rígido controle da expressão pela simples manipulação do meio de cultura e indução por metanol. As proteínas a serem expressas serão a glicoamilase e alfa-amilase, simultaneamente, em cassetes de expressão integrados na P. pastoris. Essas enzimas estão no grupo das amilases, que compõem cerca de 30% das enzimas de uso industrial no mundo, sendo amplamente utilizadas para fermentação alcoólica de etanol. Três estratégias de transformação serão testadas, nos quais, primeiramente será integrado o gene da glicoamilase no locus aox1 e a alfa-amilase no locus his4, e o inverso, além da transformação da levedura hospedeira simultaneamente com os cassetes de expressão das duas proteínas direcionando para a integração em loci diferentes. Os clones recombinantes a serem expressos em meio líquido serão selecionados meio sólido. Após a indução, os extratos serão avaliados por meio de gel SDS-PAGE e em ensaios bioquímicos para características sacarificante e dextrinizante.pt_BR
dc.description.sponsorshipCNPQpt_BR
dc.formatPDF
dc.identifier.urihttps://coarihomolog.ufam.edu.br/handle/prefix/3727
dc.languagept_BRpt_BR
dc.pibic.cursoBiotecnologiapt_BR
dc.pibic.dtfim2014-07-31
dc.pibic.dtinicio2013-08-01
dc.pibic.nrprojetoPIB-B/0106/2013
dc.pibic.projetoTransformação genética para a integração de dois cassetes de expressão no genoma da levedura Pichia pastoris.
dc.publisherUniversidade Federal do Amazonaspt_BR
dc.publisher.countryBrasilpt_BR
dc.publisher.departmentBiologiapt_BR
dc.publisher.departmentInstituto de Ciências Biológicaspt_BR
dc.publisher.initialsUFAMpt_BR
dc.publisher.programPROGRAMA PIBIC 2013pt_BR
dc.rightsAcesso Restritopt_BR
dc.subjectTransformação
dc.subjectIntegração
dc.subjectAmilases
dc.subject.cnpqCIÊNCIAS BIOLÓGICAS: BIOQUÍMICApt_BR
dc.titleTransformação genética para a integração de dois cassetes de expressão no genoma da levedura Pichia pastoris.pt_BR
dc.typeRelatório de Pesquisapt_BR

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